T/AFFI 039-2023 鲜葡萄及葡萄干中黑曲霉的测定

适用范围

主要技术内容:1  范围本标准适用于葡萄中黑曲霉的测定。本标准规定了葡萄中黑曲霉的检验方法。本文件适用于新疆地区鲜葡萄、葡萄干中黑曲霉的检测。2  规范性引用文件本文件中引用的文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用规定的一级水。3  术语和定义3.1  鲜葡萄 fresh grapes选用新鲜、洁净，经过一定加工或保鲜处理的葡萄。3.2  葡萄干 Raisins经自然风干或人工加热等方式使葡萄果实脱水而成。3.3  黑曲霉Aspergillus niger黑曲霉属于半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目、丛梗孢科、曲霉属真菌中的常见种。在高温、高湿环境下易大量生长繁殖，多生于多汁的果实上，引起腐烂变质。4  原理被感染葡萄中的黑曲霉可在马铃薯葡萄糖琼脂上于28℃条件下培养5d，检测霉菌，从中分离黑曲霉，通过生化鉴定确定黑曲霉菌并计数，算出每毫升检验中黑曲霉菌数。5  培养基与试剂5.1 培养基5.1.1马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）。5.1.2 2%淀粉查氏培养基。5.2  试剂5.2.1 无菌生理盐水。5.2.2 I2-Ki试剂(花粉活力染色液)。6  标准菌株6.1黑曲霉标准菌株7  仪器和设备7.1培养箱：28℃士1℃。7.2拍击式均质器及均质袋。电子天平：感量 0.1 g。7.3无菌锥形瓶：容量 500 mL。7.4无菌吸管：1 mL(具 0.01 mL刻度)、10 mL(具 0.1 mL 刻度)。7.5无菌试管：18 mmx180 mm。7.6旋涡混合器。7.7无菌平皿:直径 90 mm。7.8恒温水浴箱:46 ℃士1℃。7.9显微镜：10倍~100倍。7.10微量移液器及枪头：1.0 mL。7.11郝氏计测玻片：具有标准计测室的特制玻片。盖玻片。7.12测微器:具标准刻度的玻片。7.13电子天平：感量0.01 g。7.14振荡器8  检测程序见图1。图1黑曲霉菌数测定检验程序8.1  检测步骤：8.1.1称取25g样品置盛有225mL生理盐水的无菌均质袋内，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1:10的样品匀液。8.1.2 取1 mL 1:10 样品匀液注入含有9mL无菌稀释液的试管中，另换一支1mL无菌吸管反复吹吸，或

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